核酸検出について、どれくらい知っていますか?

2024/06/27 11:47

新型コロナウイルス感染症(COVID-19)の発生以来、核酸検査という言葉が頻繁に使われるようになった。核酸検査陽性は、新型コロナウイルス感染症 (COVID-19) を診断するための重要な基準です。 WST-8は核酸検査キットのAPIとなっています。核酸検査についてどれくらい知っていますか?核酸検出の原理は何ですか?なぜ核酸検査では偽陰性が発生するのでしょうか?核酸検査以外に新型コロナウイルスを検出できる技術は何ですか?

新型コロナウイルスの核酸検出原理を解明する

核酸検査とは実際には、被験者の体内に新型コロナウイルスの核酸(RNA)があるかどうかを検出するものです。各ウイルスの核酸にはリボヌクレオチドが含まれており、ウイルスごとに含まれるリボヌクレオチドの数と順序が異なるため、それぞれのウイルスが特異的になります。

新型コロナウイルスの核酸も独特であり、核酸検出は新型コロナウイルスの核酸を特異的に検出することである。核酸検査を行う前に、被験者の喀痰、咽頭ぬぐい液、気管支肺胞洗浄液、血液などのサンプルを採取する必要があり、これらのサンプルを検査することにより、被験者の気道に細菌が感染していることがわかります。新型コロナウイルスの核酸検出は、喉のぬぐい液サンプルの検出によく使用されます。サンプルを分割・精製し、そこから新型コロナウイルスの可能性のある核酸を抽出し、検査の準備を整える。

新型コロナウイルスの核酸検出には、主に蛍光定量的PCR技術とRT-PCR技術を組み合わせた蛍光定量的RT-PCR技術が使用されます。検出プロセスでは、RT-PCR技術を使用して、新型コロナウイルスの核酸(RNA)を対応するデオキシリボ核酸(DNA)に逆転写します。次に、蛍光定量的 PCR 技術を使用して、得られた DNA を大量に複製します。複製された DNA が検出され、性別プローブで標識されます。新型コロナウイルスの核酸が存在する場合、この機器は蛍光シグナルを検出でき、DNA が複製し続けるにつれて蛍光シグナルが増加し続けるため、間接的に新型コロナウイルスの存在を検出します。

核酸

なぜ偽陰性が発生するのでしょうか?

偽陰性とは、検査対象者が新型コロナウイルスに感染しているにもかかわらず、ウイルスの核酸が検出されない、つまり核酸検査が陰性であることを意味します。対象者に関連症状がなく、核酸検査が陰性だった場合、警戒を緩めやすくなり、ウイルスの拡大につながる可能性があり、これが新型コロナウイルスの狡猾さでもある。

偽陰性が発生する主な理由は次の 3 つです。

まず、元の検査検体中の新型コロナウイルスの核酸含有量が低すぎて、検出下限を下回っています。これは、収集されるサンプルの種類と収集のタイミングに関連します。

第二に、新型コロナウイルスの核酸がプローブに結合する部位が変異すると、検出時のプローブの結合効率に影響が生じ、蛍光シグナルが検出できなくなる可能性があります。

第三に、偽陰性は検出技術の感度にも関係します。流行の初期段階では、臨床キットが十分に成熟しておらず、感度も十分に高くなく、偽陰性の報告が頻繁にありました。その後、技術レベルの向上に伴い、検出精度は急速に向上し、偽陰性率は低下し続けました。

核酸検査陽性は診断となりますか?

核酸検査結果が陽性であれば、対象の上気道にウイルス核酸が存在することを確認できますが、新型冠状肺炎患者と直接診断することはできません。核酸検査が陽性の場合、被験者は疫学的な病歴に基づいてさらに診断される必要があります。接触歴などから確定症例と診断できる。

対象者に関連する症状がない場合、通常は無症候性感染症と診断されます。無症候性感染でも伝染性があり、無症候性感染者の一部は後に症状を示し始め、確定患者となった。

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新型コロナウイルスを検出するその他の技術

被験者にとって、検体からのウイルスの分離は最も信頼できる診断の根拠となります。ただし、ウイルスの分離は比較的危険な操作であり、高度な保護が施された研究室で実行する必要があり、時間と費用がかかります。 。一般の医療機関ではこのような症状はありません。そのほとんどは、血液中にウイルス抗体があるかどうかを検出する方法を使用して、被験者がウイルスに感染しているかどうかを判断します。 B型肝炎やエイズなどはすべてこの方法で検査されます。

新型コロナウイルスもこの免疫学的検出法で検出可能です。新型コロナウイルスの侵入に直面すると、人体は「抵抗」し、特異的な抗体 IgM および IgG (免疫グロブリン M および免疫グロブリン G) を産生します。これら 2 つの特異的な抗体が被験者の血液から検出された場合、被験者が新型コロナウイルスに感染していることを示す可能性があります。

抗体を検出するにはどうすればよいですか?一般的に使用される方法は、化学発光イムノアッセイです。つまり、化学発光試薬または特定の酵素を使用して抗体または抗原を標識し、免疫反応によって複合体を形成し、洗浄後に発光試薬を添加します。種特異的抗体、化学発光装置は発光シグナルを検出できます。この化学発光免疫測定法は、現在最も先進的な免疫測定法の 1 つです。高感度、強力な特異性、広い検出範囲、迅速な結果を備えていますが、検出コストが高くなります。

また、ウイルスに感染してから人体が抗体を産生するまでには一定の時間がかかるため、抗体が産生されてからでないと検出できず、抗体検出の適時性も悪いという問題がありました。 B型肝炎やエイズなどの感染症では、感染してから抗体ができるまでに2~3週間かかります。新型コロナウイルス感染後、IgM抗体の検出には3日以上、IgG抗体の検出には1週間以上かかります。

したがって、新型コロナウイルスの尾をできるだけ早くキャッ​​チするために、新型コロナウイルスの痕跡をより早く検出できる核酸検出がより多く使用されます。


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